近年來生物制藥技術(shù)發(fā)展迅速，已經(jīng)成為很多制藥企業(yè)的發(fā)展方向。生物藥品顆粒的團(tuán)聚現(xiàn)象比較普遍，隨著藥物顆粒團(tuán)聚程度加大，藥效會隨之減小，甚至可能產(chǎn)生較大的副作用。所以對于生物制藥企業(yè)，抑制團(tuán)聚物形成，準(zhǔn)確檢測團(tuán)聚物程度很重要。

根據(jù)粒徑大小，生物藥品團(tuán)聚物可大致分為小于100 nm、100 nm～10 μm和大于10 μm三種。而生物制藥行業(yè)關(guān)心的是100 nm～10 μm 范圍顆粒的濃度。常用的濃度測試方法是體積排除色譜法（小于100 nm）和液體顆粒計數(shù)儀（大于10 μm ）。有效測量100 nm～10 μm 范圍內(nèi)的顆粒團(tuán)聚物濃度的方法還較少，Bettersize2600激光粒度儀可測試100 nm～10 μm 團(tuán)聚物濃度。

（圖1  生物藥品單體團(tuán)聚過程）

在監(jiān)控生物藥品團(tuán)聚的實驗中，若實驗后的結(jié)果比原液的結(jié)果濃度增加，表示團(tuán)聚物數(shù)量增加；若粒度分布峰向大粒徑方向移動，則表示團(tuán)聚物粒徑增加。為防止藥品發(fā)生團(tuán)聚，通常需要加入穩(wěn)定劑來阻止藥物團(tuán)聚的形成，而穩(wěn)定劑的效果則需要通過監(jiān)測團(tuán)聚物濃度變化來評估。

1.團(tuán)聚物濃度的測量原理

丹東百特的Bettersize2600激光粒度儀，既能測粒度分布，又能測懸浮液濃度，因此可用來測試生物制藥100nm-10μm團(tuán)聚物的濃度以及團(tuán)聚物形成過程及濃度變化。A 和B 為不同濃度的同種顆粒樣品，用激光粒度儀得到散射光強(qiáng)度分布（如圖2 所示）。

（圖2 樣品A和樣品B的光強(qiáng)分布圖）

從上圖可以看出，各探測器所測的光強(qiáng)度與顆粒的濃度成正比。我們使用十萬分之一精度的天平稱量0.006g粒徑在0.1-10um的干粉樣品投入650ml純凈水中，理論濃度值為0.00923 g/L，使用Bettersize2600實測濃度值為0.00892g/L，理論值和實測值很接近，證明激光粒度儀測懸浮液濃度相對準(zhǔn)確，測試結(jié)果如下圖所示。

2.激光粒度儀在藥品團(tuán)聚物濃度測量中的應(yīng)用

取同一蛋白樣品分成兩份，其中一份加入穩(wěn)定劑，兩份樣品同時使用攪拌器進(jìn)行機(jī)械攪拌，在攪拌的作用下，團(tuán)聚物很快形成。在不同時間分別定量取樣使用Bettersize2600進(jìn)行測試。結(jié)果顯示，加入穩(wěn)定劑的蛋白分散液中，團(tuán)聚物顆粒數(shù)量更少，實驗數(shù)據(jù)見表1。

由此可見使用帶有濃度測試功能的激光粒度儀既可以測量樣品的粒度范圍，又可以對生物藥品中藥物單體團(tuán)聚物濃度進(jìn)行測試監(jiān)控，以對藥品藥效、安全性能等方面進(jìn)行評價。

（表1  蛋白分散液加入穩(wěn)定劑前后團(tuán)聚物濃度   mg/L）